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本發(fā)明的特征在于:應用本發(fā)明的血液基因組DNA提取方法在10分鐘內提取血液基因組可用于熒光PCR擴增檢測,主要步驟如下。(1)將**管顛倒混勻后,吸取100μL血液或者吸取100μL口腔拭子樣本保存液至,加入200μL的核酸釋放劑,渦旋混勻,然后5000g離心30s,棄上清,獲得細胞沉淀。(2)將步驟(1)中得到的血液細胞沉淀中再加入200μL核酸釋放劑,渦旋振蕩1min,至沉淀完全散開,然后5000g離心30s,棄上清。(口腔拭子樣本則無需進行此步驟)。(3)向步驟(2)所獲得的沉淀中加入50μL核酸釋放劑,渦旋振蕩1~2min;室溫放置5min,12000g離心30s,取上清液即為提取的基因組DNA;所述的核酸釋放劑組成為20mM~80mM的氫氧化鈉溶液、~、~、~、~***鈉、~3%甲酰胺;所述熒光PCR反應液組成為ROX、TaqMan探針、引物、dNTP、dUTP、UDG、BSA、聚合酶及緩沖液。附圖說明圖1為實例1檢測的8份血液樣本平行實驗的熒光擴增曲線圖。圖2~圖5為實施例1提供的四份血液樣本的三次平行實驗的熒光擴增曲線圖。圖6為實施例2對比實例1提供的對8份血液樣本平行實驗的熒光擴增曲線圖。具體實施方式為了使本領域技術領域人員更好地理解本申請中的技術方案。吉林口腔拭子口腔拭子源頭廠家然后用同樣的方法在右側臉頰部/右側上下牙床處粘膜處進行第二根拭子的取樣。
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觀察發(fā)育情況,**分布及多少,有無畸形,外陰皮膚有無紅疹、膿腫、血腫、包塊、濕疹、潰瘍、糜爛、抓痕、外傷、色素脫失、萎縮、增厚等,前庭部有無充血、潰爛、贅生物,尿道口有無分泌物及贅生物,處女膜有無裂痕,會**有無裂傷及損傷程度,前庭大腺有無腫大、觸痛,開口處有無充血、***及膿性分泌物,必要時囑患者用力屏氣以增加腹壓,觀察有無應力性尿失禁、陰道前后壁膨出及子宮脫垂,并注意其程度。中文名婦科拭子外文名DisposableCervicalSampler別名簡稱婦科采樣刷,婦科采樣器***使用婦科門診,體檢中心,婦科檢查對象女性檢查項目外**檢查目錄1婦科試子介紹2婦科檢查項目婦科拭子婦科試子介紹編輯別名簡稱:婦科拭子(婦科采樣刷,婦科采樣器)[1]英文名:DisposableCervicalSampler婦科拭子***使用于婦科門診,體檢中心,婦科檢查用于婦科檢查婦科拭子婦科檢查項目編輯外**檢查陰道檢查檢查者手持窺陰器蘸溫開水,以左手分開兩側大小**,右手將窺陰器沿陰道后壁斜向插入,邊進邊旋轉成正位,緩慢張開兩葉,暴露宮頸。注意陰道壁粘膜色澤、皺襞,有無充血、出血、裂傷、潰瘍、贅生物。
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將拭子伸進口腔,在口腔內壁來回掛拭多次,然后將拭子自然晾干,包裝起來送往檢測機構檢測即可。吉林口腔拭子口腔拭子源頭廠家
本發(fā)明涉及一種快速提取血液和口腔拭子基因組DNA的方法。背景技術:近年來,隨著熒光PCR技術的不斷成熟。該技術在科研及檢驗領域得到了應用,成為分子生物學領域不可或缺的一項重要技術。在進行遺傳背景分析過程中,血液、唾液和口腔拭子成為重要的生物分析樣本。但是,由于血液、唾液和口腔拭子中存在有很多PCR反應物,例如血液中含有血紅素,蛋白質,脂肪,抗凝劑等,唾液和口腔拭子含有蛋白質,脂肪,抗凝劑等,使得用血液、唾液和口腔拭子直接進行熒光PCR反應變得尤為困難。因此,現(xiàn)在臨床上往往先要從血液、唾液和口腔拭子樣本中純化出DNA,才能進行樣本的DNA擴增。提取血液、唾液和口腔拭子基因組的方法種類非常多,傳統(tǒng)酚氯仿抽提法,高鹽鹽析法,模離心柱吸附法,磁珠法,等等。經典的血液核酸提取方法包括幾個過程。1.通過低滲液漲破紅細胞,將血紅素物質釋放出來,然后離心,清洗去除血紅素。2.通過裂解液裂解白細胞,釋放核酸物質。3.通過離心柱或納米磁珠特異性吸附核酸物質,去除其他雜質。4.通過漂洗液洗掉掛在離心柱或納米磁珠表面的化學試劑殘留和蛋白殘留。5.加入洗脫液將核酸從離心柱或納米磁珠上洗脫下來。 吉林口腔拭子口腔拭子源頭廠家
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