Tris-HCl緩沖液的緩沖原理為:Tris中的-NH2與HCl結(jié)合生成Tris·HCl鹽。季銨基團(tuán)Tris·H+與Tris形成緩沖對,溶液中存在Tris·H++H2O←→Tris+H3O+平衡關(guān)系,憑借該平衡移動來發(fā)揮緩沖作用。其緩沖范圍一般為7.0~9.0。由于Tris對生化過程干擾很小,不與鈣、鎂離子及重金屬離子發(fā)生沉淀,所以在DNA、蛋白質(zhì)等生物大分子實(shí)驗(yàn)中經(jīng)常應(yīng)用,Tris-HCl緩沖溶液可以做DNA、蛋白質(zhì)的溶解液或提取液,也是DNA相關(guān)研究實(shí)驗(yàn)中的重要緩沖液,如DNA的捕獲與釋放、染色體的特異性標(biāo)記等方面。具體應(yīng)用方面,目前已上市的**mRNA疫苗其中一款(mRNA-1273®,Moderna,2020)選用Tris作為緩沖體系。已上市抗體藥物中也有Tris的應(yīng)用,如全球較早全人源的腫瘤壞死因子拮抗劑注射用依那西普(Enbrel,恩利)。AVT試劑級TRIS-HCl已登記。天津大批量TRIS現(xiàn)貨供應(yīng)
緩沖溶液是許多生化反應(yīng)、生產(chǎn)、實(shí)驗(yàn)過程中的重要溶液,對穩(wěn)定溶液的酸堿度有重要的影響。本文以**常見的幾種緩沖體系——磷酸鹽緩沖溶液、硼酸鹽緩沖溶液、三羥甲基氨基甲烷(簡稱Tris)-HCl緩沖溶液、羥乙基哌嗪乙磺酸(供注射用)(簡稱HEPES)緩沖溶液為例,介紹緩沖溶液的組成、緩沖原理及其在生物化學(xué)方面的應(yīng)用。對于絕大多數(shù)生物制劑(如疫苗、抗體、ADC偶聯(lián)藥物、脂質(zhì)體等)而言,實(shí)驗(yàn)操作、實(shí)際生產(chǎn)以及生物體內(nèi)的生化反應(yīng)等都需要在特定的pH值范圍內(nèi)才能正常有效地進(jìn)行,從而得到準(zhǔn)確的實(shí)驗(yàn)結(jié)論或發(fā)揮比較好的***效果。在這些反應(yīng)過程中酸堿緩沖溶液經(jīng)常發(fā)揮著非常重要的作用。如人體血漿中存在NaHCO3-H2CO3、蛋白質(zhì)鈉鹽-蛋白質(zhì)、氧合血紅蛋白鉀鹽-氧合血紅蛋白等緩沖對構(gòu)成血漿的酸堿緩沖系統(tǒng),以維持正常人血漿的pH值在7.35~7.45。若血漿pH值低于7.35或者高于7.45則分別會引起酸中毒和堿中毒,危及生命。山東采購TRIS價格藥用級TRIS-HCl中美雙報注意事項(xiàng)。
穩(wěn)定性是mRNA疫苗開發(fā)中面臨的主要挑戰(zhàn)之一,目前已上市的兩款mRNA疫苗均需要在嚴(yán)格低溫下保存和運(yùn)輸,這無疑增加了疫苗的保存和運(yùn)輸?shù)碾y度和成本,***限制了疫苗的大規(guī)模推廣普及。將制劑制成凍干劑型是提升其穩(wěn)定性**常用方法之一。目前,國內(nèi)外均有凍干劑型mRNA疫苗已進(jìn)入到臨床階段。1.國產(chǎn)全球***凍干劑型**奧密克戎株mRNA疫苗RH109進(jìn)入臨床階段6月27日,深圳市瑞吉生物科技有限公司(以下簡稱“瑞吉生物”)宣布,其研發(fā)的凍干奧密克戎株mRNA疫苗RH109由下設(shè)合資公司(武漢瑞科吉生物科技有限公司)分別在新西蘭和菲律賓獲得臨床批件。本次獲批,標(biāo)志著全球***凍干型**奧密克戎株mRNA疫苗進(jìn)入臨床階段。
Tris常用于蛋白或者核酸的緩沖液,其在電泳緩沖液中與甘氨酸構(gòu)成緩沖體系,穩(wěn)定電泳過程中的pH,由于其具有弱堿性,水溶液的pH在10.5左右,可通過添加HCl或者NaOH制備不同pH的緩沖液,根據(jù)緩沖理論,Tris緩沖液的有效范圍通常是pH7.0-9.2之間。此外,Tris還可以制備表面活性劑、硫化促進(jìn)劑和一些藥物(磷霉素等)的中間物,在化妝品、醫(yī)藥、涂料以及合成中均有應(yīng)用。應(yīng)用于體內(nèi)時,Tris作為一種不含鈉的氨基緩沖堿,在體液中與H2CO3結(jié)合,生成碳酸氫鹽。因此它能緩沖酸,而且能降低CO2張力,有糾正急性呼吸性酸中毒和代謝性酸中毒雙重效果,其作用較碳酸氫鈉快而強(qiáng)。①M(fèi)oderna**核酸疫苗(mRNA-1273,pH7.0-8.0)將SM-102、DSPC、膽固醇以及PEG脂質(zhì)與溶于pH5.0乙酸鹽緩沖液中的mRNA以2.5:1(脂質(zhì):mRNA)的比例混合,再將混合物用Tris-HCl(pH=7.5)中和,加入蔗糖作為冷凍保護(hù)劑,***將制備得到的溶液進(jìn)行無菌過濾,-70℃下冷凍保存準(zhǔn)備進(jìn)一步使用。注射級TRIS-HCl的優(yōu)勢在哪?
前述不同緩沖溶液雖然有相似之處,同時也存在差異,主要體現(xiàn)為以下幾點(diǎn):(1)緩沖溶液應(yīng)用的酸堿度環(huán)境有差異:硼酸鹽緩沖溶液和Tris-HCl緩沖溶液較適合在堿性環(huán)境中使用,而磷酸鹽緩沖溶液和HEPES緩沖溶液則多數(shù)情況下適宜運(yùn)用在pH值為6.8~8.2左右的弱酸性、弱堿性或接近中性的環(huán)境中;(2)緩沖溶液組成有差異:硼酸鹽緩沖溶液、Tris-HCl緩沖溶液及磷酸鹽緩沖溶液一般是由兩種物質(zhì)配置而成,而HEPES緩沖溶液則是由一種物質(zhì)配制;(3)緩沖溶液發(fā)揮緩沖作用的原理有一定差異:硼酸鹽緩沖溶液、Tris-HCl緩沖溶液及磷酸鹽緩沖溶液靠體系中緩沖對的電離或水解平衡移動來發(fā)揮緩沖作用,而HEPES緩沖溶液則是靠體系中平衡轉(zhuǎn)化關(guān)系來發(fā)揮緩沖作用;(4)緩沖溶液發(fā)揮作用的側(cè)重方面不同:如同是在生物藥相關(guān)方面的應(yīng)用,磷酸鹽緩沖溶液在固體藥物釋放研究中應(yīng)用較多。而硼砂緩沖溶液多用于液體藥物如滴眼液中。Tris-HCl緩沖較多用于蛋白質(zhì)、DNA等生物大分子的溶液體系中。而HEPES更側(cè)重應(yīng)用于脂質(zhì)體、細(xì)胞水平的相關(guān)生化實(shí)驗(yàn)研究中;注射用TRIS-HCl緩沖液。河南大批量TRIS價格
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奧加伊妥珠單抗(Besponsa;inotuzumabozogamicin)是輝瑞開發(fā)的一款創(chuàng)新ADC,由靶向CD22的單克隆抗體和細(xì)胞毒劑卡奇霉素兩部分組成。劑型為凍干粉,其制劑***中,蔗糖主要發(fā)揮凍干保護(hù)劑作用,氨丁三醇(TRIS)為pH緩沖劑。CD22抗原在B細(xì)胞表面普遍存在,奧加伊妥珠單抗能夠靶向*細(xì)胞,并與之表面的CD22抗原結(jié)合。隨后,這些ADC會被內(nèi)吞入*細(xì)胞,卡奇霉素會進(jìn)一步發(fā)揮它的功效,造成*細(xì)胞的死亡。2017年6月28日,BESPONSA獲歐盟批準(zhǔn)上市。2017年8月17日,美國食品藥品監(jiān)督管理局(FDA)批準(zhǔn)將BESPONSA用于***成人復(fù)發(fā)或難治性前體B細(xì)胞急性淋巴細(xì)胞白血病。值得一提的是,這是***獲得FDA批準(zhǔn)的靶向CD22的抗體偶聯(lián)藥物。天津大批量TRIS現(xiàn)貨供應(yīng)
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