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緩沖溶液的用途在有機系統(tǒng)中,天然緩沖溶液可將pH值保持在恒定水平,從而可能發(fā)生生化反應(yīng)而不會損害有機體。當(dāng)生物學(xué)家研究生物學(xué)過程時,他們必須保持相同的pH值。為此,他們使用了準(zhǔn)備好的緩沖溶液。緩沖溶液的產(chǎn)品和概念于1966年***被描述,我們使用的緩沖與許多年前的緩沖液是相同的。為了有用,生物緩沖液必須滿足多個標(biāo)準(zhǔn)。具體而言,它們應(yīng)該是水溶性的,但不溶于有機溶劑。它們不應(yīng)能夠通過細(xì)胞膜。另外,在使用它們的所有實驗中,它們必須是無毒,惰性且穩(wěn)定的。福建現(xiàn)貨TRIS現(xiàn)貨了解更多氨丁三醇相關(guān)資訊,敬請關(guān)注艾偉拓AVT!
2、HEPES緩沖液HEPES是一種非離子兩性緩沖液,其在pH7.2~7.4范圍內(nèi)具有較好的緩沖能力,常用在體外診斷、DNA/RNA提取、脂質(zhì)體藥物等方面。①HEPES緩沖液優(yōu)點:在開放式培養(yǎng)或細(xì)胞觀察時能維持較恒定的pH值,并對細(xì)胞無毒性作用。②HEPES緩沖液缺點:在高濃度時對一些細(xì)胞可能有毒,與其他緩沖劑相比成本略高。二、Tris-HCl緩沖液與HEPES緩沖液的應(yīng)用1、Tris-HCl緩沖液的應(yīng)用Tris常用于蛋白或者核酸的緩沖液,其在電泳緩沖液中與甘氨酸構(gòu)成緩沖體系,穩(wěn)定電泳過程中的pH,由于其具有弱堿性,水溶液的pH在10.5左右,可通過添加HCl或者NaOH制備不同pH的緩沖液,根據(jù)緩沖理論,Tris緩沖液的有效范圍通常是pH7.0-9.2之間。此外,Tris還可以制備表面活性劑、硫化促進(jìn)劑和一些藥物(磷霉素等)的中間物,在化妝品、醫(yī)藥、涂料以及合成中均有應(yīng)用。應(yīng)用于體內(nèi)時,Tris作為一種不含鈉的氨基緩沖堿,在體液中與H2CO3結(jié)合,生成碳酸氫鹽。因此它能緩沖酸,而且能降低CO2張力,有糾正急性呼吸性酸中毒和代謝性酸中毒雙重效果,其作用較碳酸氫鈉快而強。
什么是緩沖液?緩沖液(Buffersolution)通常是由「弱酸及其共軛堿」或「弱堿及其共軛酸」緩沖對所組成的溶液,能夠在加入一定量其他物質(zhì)時減緩pH的改變。以生物實驗中**常用的一種緩沖液PBS為例,是由Na2HPO4、KH2PO4組成的緩沖對,在PH5.8-8.0范圍內(nèi)有較強的緩沖能力。為了保證緩沖液有足夠強的緩沖能力,在配制緩沖溶液時,需要做到:為使共軛酸堿對的濃度比接近于1,應(yīng)根據(jù)所需要維持的pH范圍選擇合適的緩沖對,使其中的弱酸的pKa等于或接近于所要求的pH。例如,生物培養(yǎng)液中需用PH=7.0的緩沖溶液,已知H2PO4-的pKa2=7.21,因此,H2PO4—HPO42-是可以選擇的合適的緩沖對。如若配制PH=9.0的緩沖溶液,則可選擇NH3·H2O-NH4Cl緩沖對(pKa(NH4+)=9.25)。為什么要選注射級的TRIS-HCl?
前述不同緩沖溶液雖然有相似之處,同時也存在差異,主要體現(xiàn)為以下幾點:(1)緩沖溶液應(yīng)用的酸堿度環(huán)境有差異:硼酸鹽緩沖溶液和Tris-HCl緩沖溶液較適合在堿性環(huán)境中使用,而磷酸鹽緩沖溶液和HEPES緩沖溶液則多數(shù)情況下適宜運用在pH值為6.8~8.2左右的弱酸性、弱堿性或接近中性的環(huán)境中;(2)緩沖溶液組成有差異:硼酸鹽緩沖溶液、Tris-HCl緩沖溶液及磷酸鹽緩沖溶液一般是由兩種物質(zhì)配置而成,而HEPES緩沖溶液則是由一種物質(zhì)配制;(3)緩沖溶液發(fā)揮緩沖作用的原理有一定差異:硼酸鹽緩沖溶液、Tris-HCl緩沖溶液及磷酸鹽緩沖溶液靠體系中緩沖對的電離或水解平衡移動來發(fā)揮緩沖作用,而HEPES緩沖溶液則是靠體系中平衡轉(zhuǎn)化關(guān)系來發(fā)揮緩沖作用;(4)緩沖溶液發(fā)揮作用的側(cè)重方面不同:如同是在生物藥相關(guān)方面的應(yīng)用,磷酸鹽緩沖溶液在固體藥物釋放研究中應(yīng)用較多。而硼砂緩沖溶液多用于液體藥物如滴眼液中。Tris-HCl緩沖較多用于蛋白質(zhì)、DNA等生物大分子的溶液體系中。而HEPES更側(cè)重應(yīng)用于脂質(zhì)體、細(xì)胞水平的相關(guān)生化實驗研究中;藥用級TRIS-HCl已登記。山西高純度TRIS現(xiàn)貨
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