高效液相色譜法介紹基本原理高效液相色譜(HighPerformanceLiquidChromatography,HPLC),是在經(jīng)典液相色譜法的基礎(chǔ)上,于20世紀(jì)60年代后期引入了氣相色譜理論而迅速發(fā)展起來的。與經(jīng)典液相色譜法的區(qū)別是填料顆粒小而均勻。因為較小的填充顆粒具有高柱效,但會引起高阻力,需用高壓輸送流動相,故又稱高壓液相色譜。使用高效液相色譜時,液體待檢測物被注入色譜柱,通過壓力在固定相中移動,由于被測物種不同物質(zhì)與固定相的相互作用不同,不同的物質(zhì)順序離開色譜柱,通過檢測器得到不同的峰信號,***通過分析比對這些信號來判斷待測物所含有的物質(zhì)。高效液相色譜作為一種重要的分析方法,***地應(yīng)用于化學(xué)和生化分析中。高效液相色譜從原理上與經(jīng)典的液相色譜沒有本質(zhì)的差別,它的特點是采用了高壓輸液泵、高靈敏度檢測器和高效微粒固定相,適于分析高沸點不易揮發(fā)、分子量大、不同極性的有機化合物。線性達 3000 mAU,噪音級別降至 ±3 μAU,比較低分散和基線噪音。安徽液相色譜系統(tǒng)咨詢報價
反梯度應(yīng)用VanquishDuo系統(tǒng)提高定量分析水平,獲取更多未知化合物信息反梯度的VanquishDuo系統(tǒng)可通過電霧式檢測技術(shù)(CAD)為所有檢測分析物提供一致的響應(yīng)。等度分離可產(chǎn)生一致的CAD響應(yīng),但某些分離需要采用梯度洗脫導(dǎo)致相應(yīng)不一致。VanquishDuo系統(tǒng)通過使用第二個泵對檢測器輸送反向梯度,可實現(xiàn):?采用CAD檢測器在梯度洗脫條件下獲得一致的響應(yīng)?在無標(biāo)準(zhǔn)品的情況下,可靠地定量已知和未知化合物?通過自動反梯度計算功能考查所有系統(tǒng)體積,簡化了方法設(shè)置無論化合物何時在梯度中進行洗脫,進入檢測器的洗脫液通過反梯度補償功能,始終保持相同的溶劑組成。即使缺乏特定化合物的單個標(biāo)準(zhǔn)品,也能夠可靠地為您提供一致的定量響應(yīng)信息。進口液相色譜系統(tǒng)哪家好輕松使用擴展壓力范圍,包含專有進樣和切換閥的整個系統(tǒng)便是為之而造。
VanquishDuo系統(tǒng)無需額外的工作-自動梯度轉(zhuǎn)換ChromeleonCDS自動識別反梯度儀器配置并啟動**方法向?qū)?。該向?qū)ЫY(jié)合所有內(nèi)部體積,引導(dǎo)用戶計算反梯度并將其應(yīng)用于反梯度VanquishDuo系統(tǒng)的第二個泵上,從而為您提供比較高的定量精密度,并比較大限度地提高了易用性??纯茨e過了什么液相色譜中的大多數(shù)檢測選項都需要通過某些物理化學(xué)性質(zhì)來檢測某一物質(zhì),例如用于紫外線吸收檢測的發(fā)色團或用于質(zhì)譜檢測的離子化。電霧式檢測技術(shù)可檢測所有不同化學(xué)結(jié)構(gòu)的非揮發(fā)性分析物,同時提供一致的響應(yīng)、出色的靈敏度和較寬的線性范圍。
高效液相色譜的應(yīng)用高效液相色譜應(yīng)用非常***,幾乎遍及定量定性分析的各個領(lǐng)域。(1)分離混合物高效液相色譜法只要求樣品能制成溶液,不受樣品揮發(fā)性的限制,流動相可選擇的范圍寬,固定相的種類繁多,因而可以分離熱不穩(wěn)定和非揮發(fā)性的、離解的和非離解的以及各種分子量范圍的物質(zhì)。通過與試樣預(yù)處理技術(shù)相配合,高效液相色譜法所達到的高分辨率和高靈敏度,可分離并同時測定性質(zhì)上十分相近的物質(zhì),能夠分離復(fù)雜混合物中的微量成分。并且隨著固定相的發(fā)展,還可在充分保持生化物質(zhì)活性的條件下完成對其的分離。(2)生化分析由于高效液相色譜法具有高分辨率、高靈敏度、速度快、色譜柱可反復(fù)利用,流出組分易收集等優(yōu)點,因而被廣泛應(yīng)用到生物化學(xué)、食品分析、醫(yī)藥研究、環(huán)境分析、無機分析等各種領(lǐng)域,并已成為解決生化分析問題**有前途的方法。(3)儀器聯(lián)用高效液相色譜儀與結(jié)構(gòu)儀器的聯(lián)用是一個重要的發(fā)展方向。高效液相色譜一質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)受到普遍重視,如分析氨基甲酸酯農(nóng)藥和多核芳烴等:高效液相色譜一紅外光譜聯(lián)用也發(fā)展很快,如在環(huán)境污染分析測定水中的烴類等.使環(huán)境污染分析得到新的發(fā)展。液相色譜系統(tǒng)選哪家?給你推薦上海禹重科技!
高效液相色譜分離原理液-液分配(Liquid-liquidPartitionChromatography)及化學(xué)鍵合相色譜(ChemicallyBondedPhaseChromatography) 流動相和固定相都是液體。流動相與固定相之間應(yīng)互不相溶(極性不同,避免固定液流失),有一個明顯的分界面。當(dāng)試樣進入色譜柱,溶質(zhì)在兩相間進行分配。達到平衡時,服從于高效液相色譜計算公式:式中,cs—溶質(zhì)在固定相中濃度;cm—溶質(zhì)在流動相中的濃度;Vs—固定相的體積;Vm—流動相的體積。LLPC與GPC有相似之處,即分離的順序取決于K,K大的組分保留值大;但也有不同之處,GPC中,流動相對K影響不大,LLPC流動相對K影響較大。a.正相液-液分配色譜法(NormalPhaseliquidChromatography):流動相的極性小于固定液的極性。b.反相液-液分配色譜法(ReversePhaseliquidChromatography):流動相的極性大于固定液的極性。c.液-液分配色譜法的缺點:盡管流動相與固定相的極性要求完全不同,但固定液在流動相中仍有微量溶解;流動相通過色譜柱時的機械沖擊力,會造成固定液流失。上世紀(jì)70年代末發(fā)展的化學(xué)鍵合固定相(見后),可克服上述缺點。使用智能軟件向?qū)Ш喕墓ぷ髁鞒?。安徽液相色譜系統(tǒng)咨詢報價
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