LentiBOOST是德國(guó)Sirion Biotech開(kāi)發(fā)的一種高效、無(wú)細(xì)胞毒性的慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)增強(qiáng)劑,用于臨床前和臨床的慢病毒載體轉(zhuǎn)導(dǎo)。它是一種非離子型、非受體依賴性的表面活性劑,通過(guò)降低細(xì)胞膜粘稠度、提高脂質(zhì)交換和跨膜轉(zhuǎn)運(yùn),促進(jìn)慢病毒與細(xì)胞膜的融合,提高轉(zhuǎn)導(dǎo)效率。SIRION Biotech 為研究機(jī)構(gòu)和醫(yī)院開(kāi)發(fā)了一種定制的許可模式,并為臨床試驗(yàn)提供良好的 GMP 材料供應(yīng)條件。LentiBOOST 目前在美國(guó)和歐洲的多個(gè)臨床試驗(yàn)中使用。LentiBOOST(Pharma grade)jin用于藥物級(jí)的臨床前研究和工藝開(kāi)發(fā),以及評(píng)估研究。LentiBOOST(GMP grade)用于臨床階段方案,目前美國(guó)和歐洲多個(gè) Phase III 和 Phase I/II 臨床試驗(yàn)正在進(jìn)行。更多關(guān)于Sirion Biotech LentiBOOST相關(guān)產(chǎn)品問(wèn)題,歡迎咨詢上海曼博生物!加入什么試劑可以提高轉(zhuǎn)導(dǎo)效率?多功能慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)試劑
研究發(fā)現(xiàn) LentiBOOST 和硫酸魚(yú)精蛋白的組合使用可以產(chǎn)生比polybrene更高的轉(zhuǎn)導(dǎo)效率,且對(duì)細(xì)胞活力或干細(xì)胞特性沒(méi)有劑量依賴性的不良影響。這種轉(zhuǎn)導(dǎo)增強(qiáng)劑的組合dai biao了一種有價(jià)值的臨床兼容性polybrene替代方案,具有顯著提高基因zhi liao應(yīng)用中 MSCs 慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)效率的潛力。細(xì)胞狀態(tài)對(duì)于慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)效率也具有很大的影響,良好的生長(zhǎng)狀態(tài)是達(dá)到高gan ran效率的保證,一般選擇細(xì)胞形態(tài)較好、輪廓清晰、處于對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞進(jìn)行g(shù)an ran可提高gan ran效率。更多關(guān)于慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)相關(guān)問(wèn)題,歡迎咨詢上海曼博生物!多功能慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)試劑什么試劑可以提高慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)效率呢?
聚凝胺(polybrene)是一種陽(yáng)離子聚合物,1971年研究證明它可提高逆轉(zhuǎn)錄病毒的轉(zhuǎn)導(dǎo)效率。polybrene的確切作用機(jī)制尚不清楚,多認(rèn)為它是通過(guò)中和細(xì)胞表面與病毒粒子之間的負(fù)靜電斥力,使病毒粒子容易吸附在細(xì)胞表面,從而促進(jìn)病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)。在增強(qiáng)各種細(xì)胞的慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)中,轉(zhuǎn)導(dǎo)效率隨polybrene濃度的增加而增加。但轉(zhuǎn)導(dǎo)增強(qiáng)的同時(shí)也會(huì)對(duì)細(xì)胞產(chǎn)生一定毒性作用,polybrene不僅對(duì)細(xì)胞增殖有劑量依賴性抑制作用,還會(huì)不同程度的影響各類細(xì)胞的生長(zhǎng)潛力。
慢病毒gan ran效率受到多種因素的影響,首先,考慮病毒包裝制備是否存在問(wèn)題,比如外源基因是否正確,病毒滴度是否合格等。其次,考慮病毒運(yùn)輸和保存方式是否得當(dāng),解凍病毒一定要在冰上進(jìn)行,避免反復(fù)凍融,否則會(huì)影響病毒滴度;-80℃保存半年以上需要重新測(cè)定滴度。細(xì)胞狀態(tài)對(duì)于慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)效率也具有很大的影響,良好的生長(zhǎng)狀態(tài)是達(dá)到高gan ran效率的保證,一般選擇細(xì)胞形態(tài)較好、輪廓清晰、處于對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞進(jìn)行g(shù)an ran可提高gan ran效率。
第三代慢病毒載體系統(tǒng)又增加了兩個(gè)安全特性:一是構(gòu)建了自身失活的慢病毒載體,即刪除了U3區(qū)的3’ LTR,使載體失去HIV-1增強(qiáng)子及啟動(dòng)子序列,即使存在所有的病毒蛋白也不能轉(zhuǎn)錄出RNA;二是去除了tat基因,代之以異源啟動(dòng)子序列,這樣原始的HIV基因組中的9個(gè)基因在慢病毒載體中只保留了3個(gè)(gag、pol和rev) ,因此第三代慢病毒載體系統(tǒng)更加安全。與第三代系統(tǒng)相比,第二代慢病毒系統(tǒng)使用更多的HIV蛋白(在較少的質(zhì)粒上)以產(chǎn)生功能性慢病毒顆粒。第三代包裝系統(tǒng)不表示tat,被認(rèn)為比第二代系統(tǒng)更安全,但可能更難使用,因?yàn)樗鼈冃枰盟膫€(gè)單獨(dú)的質(zhì)粒轉(zhuǎn)染才能產(chǎn)生功能性慢病毒顆粒。慢病毒包裝系統(tǒng)一般都是三質(zhì)?;蛩馁|(zhì)粒包裝系統(tǒng)。
新合成的逆轉(zhuǎn)錄病毒DNA整合到宿主DNA中,稱為原病毒。
SIRION Biotech成立于2005年,旨在領(lǐng)導(dǎo)下一代病毒載體技術(shù),用于基因和細(xì)胞zhi liao以及疫苗開(kāi)發(fā)?,F(xiàn)在,SIRION提供了一個(gè)基于慢病毒、腺病毒和類腺病毒的quan mian的病毒載體技術(shù)平臺(tái),加速了基因zhi liao研究和藥物開(kāi)發(fā)。SIRION正成為這一增長(zhǎng)領(lǐng)域的優(yōu)先合作伙伴。從早期臨床階段I/II到晚期臨床階段III的臨床試驗(yàn)中使用了LentBoost并證明了在改善zhi liao載體的轉(zhuǎn)導(dǎo)方面的臨床成功。德國(guó) Sirion Biotech 公司研發(fā)了 LentiBOOST 慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)增強(qiáng)劑,專為提高病毒基因轉(zhuǎn)導(dǎo)難轉(zhuǎn)的哺乳動(dòng)物和嚙齒動(dòng)物細(xì)胞的效率。LentiBOOST 是一種無(wú)細(xì)胞毒性的慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)增強(qiáng)劑,用于臨床前和臨床應(yīng)用。作為一種普遍作用的(受體非依賴型)佐劑,可應(yīng)用于多種臨床相關(guān)細(xì)胞類型,CD34+造血干細(xì)胞(HSCs)、原代 T 細(xì)胞和 NK 細(xì)胞等,對(duì)難轉(zhuǎn)導(dǎo)的小鼠 T 細(xì)胞亦有效。LentiBOOST 已成為改進(jìn)體外 (ex vivo) 基因zhi liao和 CAR-T 細(xì)胞zhi liao的臨床轉(zhuǎn)導(dǎo)方案的選擇。更多關(guān)于Sirion Biotech LentiBOOST慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)增強(qiáng)劑,歡迎咨詢上海曼博生物!什么試劑可以增強(qiáng)慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)的效率?干細(xì)胞慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)關(guān)鍵要素
國(guó)內(nèi)做慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)增強(qiáng)劑的公司有哪些?多功能慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)試劑
LentiBOOST(Pharma grade)jin用于藥物級(jí)的臨床前研究和工藝開(kāi)發(fā),以及評(píng)估研究。LentiBOOST(GMP grade)用于臨床階段方案,目前美國(guó)和歐洲多個(gè) Phase III 和 Phase I/II 臨床試驗(yàn)正在進(jìn)行。Lentiboost可增強(qiáng)慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)效率,高達(dá)90%以上,研究證明對(duì)于細(xì)胞增殖無(wú)不良影響,且在T細(xì)胞中觀察到一定的促增殖效果??蓽p少M(fèi)OI,從而降低物料成本。均勻增加慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)細(xì)胞的數(shù)量,但不會(huì)過(guò)度增加單個(gè)細(xì)胞病毒載體拷貝數(shù)(VCN),符合FDA/EMA對(duì)ATMP產(chǎn)品的安全標(biāo)準(zhǔn)。
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