MirusPEI轉染試劑說明書

來源: 發(fā)布時間:2024-12-07

產品簡介:Polysciences轉染試劑系列是基于聚乙烯亞胺(Polyethylenimine,PEI)的產品,因其較高的轉染效果,已廣泛應用于工業(yè)化生產。聚乙烯亞胺是一種具有較高的陽離子電荷密度的有機大分子,每相隔二個碳原子,即每“第三個原子都是質子化的氨基氮原子,使得聚合物網絡在任何pH下都能充當有效的“質子海綿”體(protonsponge)。PEI可用作轉染試劑,它可以縮聚DNA分子形成顆粒并轉染真核細胞。有實驗證明,分子量為25000的線性PEI即Polysciences23966(PEI25K)轉染效率表現(xiàn)優(yōu)良。產品特點:適用于生產mABs、rAbs、bsABs和病毒載體(AVV、LV、BEV);在HEK293、CHO和Sf9細胞系中高度有效;適用于從研發(fā)到工業(yè)化生產的各個階段;可預測,可大規(guī)模生產;兩周內即可生成大量目標蛋白或病毒;高轉染效率;大量已發(fā)表的文獻支持。用PEI轉染時,一般和DNA的比例是?MirusPEI轉染試劑說明書

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PEI在于可以應用于體內試驗。當初試驗經費很有限,被逼無奈只能放棄脂質體2000,選擇PEI,以至于相當長的時間內,轉染試驗都不順利。下面是幾點關于PEI轉染的注意要點:1.PEI的使用量可以參照脂質體2000的說明書,所用質粒盡量去內2.轉染時,一定要把PEI+DMEM加入到質粒+DMEM中,順序不可錯,輕微混勻,靜止20min3.轉染后4小時,一定要換液!換含有FBS的完全培養(yǎng)液!因為PEI對細胞毒性太大4.如果后續(xù)試驗涉及到穩(wěn)定篩選,建議把血清濃度適當提高。PS:事實證明,PEI是可行的,已經做出穩(wěn)定細胞系了。Polysciences轉染與遞送相關產品已正式移交KyforaBio,相關產品標簽將變更為KyforaBiobyPolysciences,后續(xù)購買請認準備新品牌。更多關于PEI轉染試劑相關的信息,可咨詢上海曼博生物醫(yī)藥科技有限公司!PEI轉染試劑作用原理PEI轉染試劑和其他轉染試劑相比有什么優(yōu)勢?

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注意事項質粒質量:請務必使用高質量轉染級無內質粒(推薦使用QIAGEN或者MN公司去內質粒提取試劑盒)。通過260nm光吸收測定DNA濃度,260nm/280nm比值確定DNA純度(比值應該在1.8~2.0的范圍之內)。如有可能,請通過瓊脂糖凝膠電泳檢測質粒的完整性。細胞條件:使用適當保存和經常傳代的健康細胞。確保培養(yǎng)基沒有被細菌、或支原體污染。如果細胞是近期復蘇的液氮凍存細胞,請在轉染前至少傳代兩次。建議使用GIBCO或者78bio公司血清培養(yǎng)細胞。如想申請PEI試用裝,歡迎關注公眾號:Mine-bio,回復“申請PEI”,即可參加!

上海曼博生物醫(yī)藥科技有限公司成立于2019年,依托于集團公司泉心泉意深厚的資源和超過400家國內客戶群體,生命科學領域一站式供應鏈體系,以及高風險生物危險材料進出口平臺的優(yōu)勢,曼博生物嚴格篩選國際創(chuàng)新且經過同行驗證過的產品和技術,引入中國市場,開發(fā)、孵育和推廣,致力于將全球創(chuàng)新產品和前沿技術帶入中國,集中在為細胞/基因領域、/免疫,抗體藥物研發(fā)客戶提供小眾創(chuàng)新產品,包括從Researchgrade到cGMP等級的無動物源培養(yǎng)基質,轉染試劑、病毒轉導試劑、基因編輯工具等產品和定制服務,支持ATMP(AdvanceTherapyMedicinalProducts)藥物研發(fā)從R&D到Clinicaltrial以及后期商業(yè)化的無縫轉化。更多關于Polysciences PEI相關產品問題,歡迎咨詢上海曼博生物!也歡迎關注我們的公眾號:Mine-Bio.有哪些品牌的PEI轉染試劑?

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有人知道PEI轉染試劑的價格么?MirusPEI轉染試劑說明書

1.對于某些類型的細胞如HEK-293、HEK293T、NIH/3T3和COS細胞,在轉染前兩天鋪板可顯著提高轉入基因的表達水平。如果選擇轉染前兩天鋪板,可適當降低鋪板密度,以確保轉染時細胞的匯合度仍為70~80%。2.對于接觸抑制敏感的細胞,可適當降低鋪板密度。3.即使在有蛋白(如10%的血清)存在的情況下,DNA-PEI復合物仍能轉染細胞,但是DNA-PEI復合物必須在無蛋白存在的條件下形成。我們推薦使用Opti-MEMITM培養(yǎng)基以達到*轉染效率。其他的無蛋白培養(yǎng)基則需測試與線性PEI轉染試劑的兼容性。4.對大多數(shù)細胞來而言,每1μgDNA使用3.0μLEndoFectinTM試劑都能獲得較高轉染效率。使用者也可嘗試每1μgDNA使用1~4μL體積線性PEI轉染試劑進行優(yōu)化。更多關于PEI轉染試劑相關產品技術問題,歡迎咨詢上海曼博生物。也可關注我們的公眾號:Mine-bio,查看更多技術文章!MirusPEI轉染試劑說明書