浙江外泌體超濾離心管選擇

超濾離心管應(yīng)用：1、組成部分：該裝置包括一個蓋子、一個過濾器和一個50ML的離心管。2、帶有擺桶式或定角式轉(zhuǎn)子的離心器以及可以容納50mL試管的樣本腔/試管座。①注意：為了避免在離心過程中損壞裝置，在旋轉(zhuǎn)前請檢查間隙。 3、帶有200微升(μL)的移液管，用于濃縮液回收適用性。①注意：該產(chǎn)品未經(jīng)消毒，只供一次使用，保質(zhì)期3年。為確保對預(yù)定用途的適用性，建議進(jìn)行初步的回收和截留試驗(yàn)。4、濃縮含有抗原、抗體、酶、核酸(單株或雙株DNA/RNA樣本)、微生物、洗出液和凈化樣本的生物樣本。5、凈化組織培養(yǎng)基提取液和細(xì)胞溶解液中的大分子成分，從反應(yīng)混合液中去除引物、連接或分子標(biāo)記，在HPLC之前去除蛋白質(zhì)。超濾離心管也可用于海洋科學(xué)研究中，以檢測水樣中的微量元素和化合物。浙江外泌體超濾離心管選擇

超濾是大分子脫鹽、濃縮較方便的方法，重復(fù)性好，得率有保障，已經(jīng)在蛋白、抗體、病毒、核酸、囊泡等樣品制備中建立標(biāo)準(zhǔn)操作；在目前大熱的外泌體制備中也已經(jīng)成為主流方法。超濾管采用離心方式快速處理樣品，是很多科研小伙伴們每天要用到的基本裝備。但是，在默克生命科學(xué)團(tuán)隊(duì)推出超濾管中文說明書(AU0.5/4/15)之前，我們發(fā)現(xiàn)近90%的使用者在選擇和使用過程中因?yàn)槿狈Ρ匾畔⒍鴽]有獲得較佳體驗(yàn)，更重要的是，寶貴的樣本會遭受本可避免的損失！如果目的蛋白是120kDa，請問應(yīng)該選擇的超濾管規(guī)格是100k，50k，還是30k甚至10k？你采用的是1/2，1/3抑或1/6算法？這些沒有統(tǒng)一的說法，是因?yàn)椴煌瑥S家的膜的截留分子量的定義不同。遼寧超濾離心管規(guī)格超濾離心管還可用于制備純度高的酶、蛋白質(zhì)等生物制品，以滿足不同實(shí)驗(yàn)室和行業(yè)的需求。

超濾離心管，備有四種材質(zhì)的超濾膜：聚醚砜、三醋酸纖維素、再生纖維素和Hydrosart，可根據(jù)不同要求靈活選用；兩種回收濃縮液的方法：既可用吸管直接吸取并回收，又可將離心管放入離心機(jī)反甩，將濃縮液甩入回收帽中，加蓋保存。這兩種方法都可使?jié)饪s液達(dá)到近乎完全回收；截留分子量普遍，配有3K、5K、10k、30K、50K、100K、300K、1000K、0.2μl的聚醚砜膜；新推出產(chǎn)品膜2K型，具有極低的蛋白吸附特性，高流速、高通量，是免疫球蛋白濃縮和脫鹽的理想用膜。用以濃縮蛋白，如果要換Buffer，在總蛋白液濃縮至1ml左右的時候，輕輕加入新的Buffer（經(jīng)0.22um超濾膜超濾），再 濃縮至1ml左右，連續(xù)三次，之后一次的濃縮終體積根據(jù)需要的蛋白濃度而定，一般不多于500ul，也有濃縮至200ul以內(nèi)的情況。按照每次至少10倍左右的體積濃縮算，三次達(dá)到1000倍以上，基本上可以達(dá)到換buffer的目的。

玻璃離心管：使用玻璃管時離心力不宜過大，需要墊橡膠墊，防止管子破碎，高速離心機(jī)一般不選用玻璃管。離心管蓋子封閉性不夠好，液體就不能加滿（針對高速離心機(jī)且使用角轉(zhuǎn)子）以防外溢，失去平衡。外溢后果是污染轉(zhuǎn)子和離心腔，影響感應(yīng)器正常工作。超速離心時，液體一定要加滿離心管，因?yàn)槌x需要抽高真空，只有加滿才能避免離心管變形。塑料離心管：塑料離心管的優(yōu)點(diǎn)是透明或者是半透明的，它的硬度小，可用穿刺法取出樣本。缺點(diǎn)是易變形，抗有機(jī)溶劑腐蝕性差，使用壽命短。塑料的離心管又有PP（聚丙烯）、PC (聚碳酸酯)，PE (聚乙烯)等材質(zhì)。PP的管子性能相對來說比較好。塑料的離心管透明或者半透明，可以直觀的看到樣品離心情況，但是比較容易變形，抗有機(jī)溶劑的腐蝕性較差，所以使用壽命較短。因此，實(shí)驗(yàn)室一般會經(jīng)常購買離心管。使用超濾離心管時應(yīng)注意避免振動或震動造成樣品混亂并影響分離效果。

超濾離心管采用再生纖維素膜，具有較高的回收率（>90%）和 高濃縮倍數(shù)（80–100 倍），100%完整性檢測確保性能可靠，主要應(yīng)用與生物樣品與蛋白濃縮、大分子組分的純化、脫鹽和緩沖液更換。再生纖維素膜具有一系列截留分子量，用戶可根據(jù)目的蛋白的分子量與濃縮前體積、濃縮目標(biāo)體積，選用不同體積大小和MWCO的超濾管。超濾離心管備有四種材質(zhì)的超濾膜：聚醚砜、三醋酸纖維素、再生纖維素和Hydrosart，可根據(jù)不同要求靈活選用。超濾離心管應(yīng)用范圍：*生物樣品濃縮：包括抗原、抗體、酶、核酸或微生物。*對組織培養(yǎng)提取物或細(xì)胞裂解液中大分子組分的純化。*對稀釋或從柱洗脫液預(yù)先純化的蛋白質(zhì)進(jìn)行濃縮。*脫鹽和緩沖液更換。超濾離心管通常被用于生物醫(yī)學(xué)、制藥、食品科學(xué)等領(lǐng)域中。浙江外泌體超濾離心管選擇

超濾離心管可根據(jù)不同孔徑大小選擇超濾膜，以便過濾出所需大小范圍內(nèi)的目標(biāo)分子。浙江外泌體超濾離心管選擇

超濾離心管使用注意事項(xiàng)：當(dāng)濃縮到剩下1ml時，取50ul緩沖溶液，加入10ul流穿，看有沒變藍(lán)色，以此判斷超濾管是否漏掉蛋白。如果管漏了，將上層和流穿重新倒入新管中開始超濾。要精確判斷是否漏管，用5mgml的BSA離心10min，再取流穿，跑蛋白膠或Bradford粗測，繼續(xù)加入剩下的蛋白液濃縮（在冰上操作，防止蛋白受熱），直到所有濃縮液都加完為止。離心過程中注意是否發(fā)生蛋白沉淀，導(dǎo)致堵管。若發(fā)生沉淀，要確定沉淀的具體原因，是蛋白濃度過高還是Buffer不合適；前者可用多根超濾管同時超濾，降低濃度的辦法解決，后者的方法是換不同的緩沖溶液，直到蛋白不發(fā)生沉淀為止。浙江外泌體超濾離心管選擇

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