超濾離心管通常不需要預(yù)處理即可使用,不過對于蛋白質(zhì)樣本處理,特別是較稀的蛋白質(zhì)溶液來說(<10ug/mL),用超濾膜濃縮回收率常常是不定量的。雖然PES材料使非特異吸附較小化,但是,某些蛋白,特別是稀的時候,會有問題。非特異結(jié)合的程度隨著個別蛋白結(jié)構(gòu)的不同而不同。含有帶電的或者疏水結(jié)構(gòu)域的蛋白質(zhì)更易于不可逆結(jié)合到不同表面。對超濾離心管表面做鈍化預(yù)處理可降低蛋白質(zhì)在膜表面的吸附性損失,大多數(shù)情況下,在濃縮稀蛋白溶液之前預(yù)處理柱子可以提高回收率,因?yàn)槿芤嚎商顫M膜和表面暴露的空白蛋白吸附位點(diǎn)。鈍化的方法是預(yù)先用較高容積的鈍化溶液預(yù)浸泡柱子1小時以上,蒸餾水徹底沖洗柱子,再用蒸餾水離心一次以徹底除去可能殘留在膜上的鈍化溶液。注意鈍化處理后別讓膜干了。如果要留待以后使用,需要加無菌蒸餾水保持膜濕潤。超濾離心管的選擇取決于被過濾的溶液或混合物的性質(zhì)及所需的純度和體積。北京高離心力離心管采購
離心過濾器具有快速超過濾功能,能夠達(dá)到較高的濃縮系數(shù),易于從稀釋液和復(fù)雜的樣本組合進(jìn)行濃縮液回收。其豎式設(shè)計(jì)以及可用的濾膜表面積能提供快速的樣本處理和較高的樣本回收率(通常大于90%稀薄的初始溶液),并能進(jìn)行80倍濃縮。典型的處理時間為15至60分鐘,這取決于標(biāo)稱分子量限值(NMWL)。豎式設(shè)計(jì)將溶質(zhì)極化和之后造成的濾膜結(jié)垢降至較低,過濾裝置中的物理止濾點(diǎn)防止過濾器旋轉(zhuǎn)過度使樣本干燥和造成樣本損失。濃縮液用移液管從過濾器的樣本槽中收集,而超過濾濾出液則收集到所提供的離心管中。該裝置可在擺桶或定角轉(zhuǎn)子中旋轉(zhuǎn)。裝置未經(jīng)消毒,只供—次使用。嘉興離心管價位離心機(jī)轉(zhuǎn)速會影響到超濾效果,因此需要根據(jù)實(shí)驗(yàn)要求調(diào)整相應(yīng)的轉(zhuǎn)速。
超濾離心管的原理:根據(jù)標(biāo)稱分子量限值(NMWL)的不同,典型處理時間為10-30分鐘。超濾膜的垂直設(shè)計(jì)也較大程度降低了溶質(zhì)極化造成的濾膜結(jié)垢;Chemicalbook死體積設(shè)計(jì)能有效防止過度離心使樣本干掉而造成樣本損失。收集濾出液后,濃縮樣本(截留部分)可通過一個簡便的倒置(上下反轉(zhuǎn))離心步驟而實(shí)現(xiàn)高效回收。超濾離心管的應(yīng)用:1)濃縮含有抗原、抗體、酶、核酸(DNA/RNA樣本,單鏈或雙鏈)、噬菌體等微生物樣本2)純化組織培養(yǎng)提取液或細(xì)胞裂解液中的大分子成分,去除反應(yīng)液中的引物、接頭或分子標(biāo)記,在HPLC前去除蛋白質(zhì)。3)除鹽,緩沖液更換,或滲濾。
超濾是大分子脫鹽、濃縮較方便的方法,重復(fù)性好,得率有保障,已經(jīng)在蛋白、抗體、病毒、核酸、囊泡等樣品制備中建立標(biāo)準(zhǔn)操作;在目前大熱的外泌體制備中也已經(jīng)成為主流方法。超濾管采用離心方式快速處理樣品,是很多科研小伙伴們每天要用到的基本裝備。但是,在默克生命科學(xué)團(tuán)隊(duì)推出超濾管中文說明書(AU0.5/4/15)之前,我們發(fā)現(xiàn)近90%的使用者在選擇和使用過程中因?yàn)槿狈Ρ匾畔⒍鴽]有獲得較佳體驗(yàn),更重要的是,寶貴的樣本會遭受本可避免的損失!如果目的蛋白是120kDa,請問應(yīng)該選擇的超濾管規(guī)格是100k,50k,還是30k甚至10k?你采用的是1/2,1/3抑或1/6算法?這些沒有統(tǒng)一的說法,是因?yàn)椴煌瑥S家的膜的截留分子量的定義不同。在使用超濾離心管時,需要注意保持管子清潔、干燥和無污染。
實(shí)驗(yàn)室常用的離心管有塑料的和玻璃的,一般塑料的用得較多,因?yàn)椴AУ碾x心管不能用在高速或者超速離心機(jī)上。塑料的離心管又有PC (聚碳酸酯)、PE (聚乙烯)、PP(聚丙烯)等材質(zhì)。PP的管子性能相對來說比較好。塑料的離心管透明或者半透明,可以直觀地看到樣品的離心情況,但是比較容易變形,抗有機(jī)溶劑的腐蝕性較差,所以使用壽命較短。因此,實(shí)驗(yàn)室一般會經(jīng)常購買離心管。PC (聚碳酸酯):透明度較好,硬度大,可以高溫消毒,但不耐強(qiáng)酸強(qiáng)堿以及一些有機(jī)溶劑如酒精之類。主要用于5萬轉(zhuǎn)以上的超高速離心。PE(聚乙烯):不透明。和丙銅、醋酸、鹽酸等不反應(yīng),較為穩(wěn)定,高溫下容易變軟。PP(聚丙烯):半透明,化學(xué)及溫度穩(wěn)定性較好,但是在低溫下會變脆,所以在離心時不要在4℃以下。超濾離心管可以用于制備疫苗、抗體等生物制品,以緩解某些疾病。嘉興離心管價位
超濾離心管還可以用于檢測樣品中的元素、抗體等生物活性分子。北京高離心力離心管采購
超濾離心管具有快速超濾功能,能夠達(dá)到較高的濃縮倍數(shù),輕松實(shí)現(xiàn)從稀釋和復(fù)雜的混和樣本中濃縮回收目的產(chǎn)物。垂直設(shè)計(jì)的超濾膜以及較大的有效濾膜表面積有助于快速的樣本處理,獲得較高樣本回收率(通常>90%),并達(dá)到30倍的濃縮。產(chǎn)品特點(diǎn):超濾離心管設(shè)計(jì)用于體外診斷,包括分析濃縮血清、尿液、腦脊液和其他體液;*內(nèi)附膜可高效回收分子量范圍的有效成分;*截留回收率高達(dá)80%以上;*標(biāo)注濃縮量為200μl;*使用固定轉(zhuǎn)子離心機(jī)時,較大處理樣本量為10ml,較大RCF為5000xg;*使用吊桶式離心機(jī)時,較大處理樣本量為12ml,較大RCF為4000xg;*熱密封膜較大限度地減少了下游提取物;*垂直膜的設(shè)計(jì)減少濃縮所用時間(10-15分鐘);*管體有帶刻度印刷標(biāo)識及可寫入文字的白色的區(qū)域;*經(jīng)過嚴(yán)格的泄漏測試。北京高離心力離心管采購
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