在將進(jìn)行ChIP咳PCR實(shí)驗(yàn)的地點(diǎn)期近,不得打開含有擴(kuò)增PCR產(chǎn)物約試幢。 確保您使用的抗體是在ChIP中給證過的抗體。關(guān)于ChIP抗體約完整選擇過程,請參見默克官網(wǎng)表觀遺傳學(xué)。如果您正使用ChIP抗體,請?jiān)黾涌贵w的解育時(shí)間。?一般1-10uq ChIP抗體是足夠的。但是,所需抗體量可能取決于您的靶輪蛋白相對豐度和抗體與靶標(biāo)的親和力。?在交聯(lián)前,單獨(dú)準(zhǔn)備一個平板,用于測定細(xì)胞數(shù)。重新評價(jià)每個反應(yīng)的細(xì)您數(shù)。增加您的細(xì)晚數(shù),特別是在嘗試檢測較任豐度的靶蛋白時(shí)。找Abcam抗體哪家靠譜?青浦區(qū)H3抗體抗體咨詢問價(jià)
無信號 在檢測之前,轉(zhuǎn)印膜在貯藏過程中發(fā) 生蛋白降解 二抗選擇錯誤 曝光時(shí)間太短 抗原上樣量不足 抗原可能被破壞 檢測系統(tǒng) 一抗的親和力較低 化學(xué)發(fā)光底物已喪失活性。 已從膜上剝離抗體并再次雜交。 處理方法 使用新轉(zhuǎn)的膜進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。 檢查是否使用適當(dāng)?shù)亩埂? 增加曝光時(shí)間。 在凝膠上載入更多的抗原,或在載入之前使用超濾管濃縮樣品, 或使用免疫沉淀,以增加凝膠中的目標(biāo)蛋白量。 檢查確保電泳處理未破壞抗原性。 增加(和優(yōu)化)一抗的濃度和培養(yǎng)時(shí)間、溫度。寶山區(qū)組蛋白抗體抗體聯(lián)系電話益啟生物的抗體怎么樣?
ChIlP檢測用磁力架 我們擁有多種用于Magna ChIP檢測的磁力架供您選擇∶常規(guī)Magna GrlP磁力架,,加強(qiáng)型PureProteome磁力架和高通量ChIP的理想之選——***推出的Magna GrlPHT96磁力架。PureProteome 磁力架 微珠捕獲效率高∶比較高比較強(qiáng)度的梯形磁體可捕獲?多達(dá)300微升磁珠 ***效率高∶可移動磁體和獨(dú)特的渦旋內(nèi)表?面設(shè)計(jì)使微珠混合更加充分 操作性強(qiáng)∶符合人體工程學(xué)設(shè)計(jì)的磁力架可安全插放1.5mL和2mL反應(yīng)管 Protein A/G beads 背景更低,富集倍數(shù)更高 Troubleshooting 問題 可能的原因 建議的處理步驟
信號弱 信號高 本底較高 準(zhǔn)確度較低(一偶然誤差) 計(jì)算的教據(jù)過高或過任《一系統(tǒng)誤差,數(shù)據(jù)與"標(biāo)準(zhǔn)數(shù)據(jù)"的偏差) 可能的原因: 實(shí)驗(yàn)試劑使用錯誤實(shí)驗(yàn)試劑損壞 所用實(shí)驗(yàn)試劑稀釋度錯誤儀器的過濾器選擇錯誤(波長)前育時(shí)間過短,溫度過低 試劑溫度不正確 在較高濃度時(shí),疊氮化鈉、燕基乙身或DTT可能干擾過氧化物恃活性。所用實(shí)驗(yàn)試劑稀釋度錯誤醇育時(shí)間過長,溫度過高 洗洛不足洗得污染 試劑或小瓶/試管受到以前實(shí)驗(yàn)的污染 所用實(shí)驗(yàn)試劑(抗體和等結(jié)合物)稀釋度錯誤多種科研抗體的直銷公司。
在保存抗體時(shí)請注意以下幾點(diǎn): 為保持比較大反應(yīng)性,應(yīng)按照廠家說明書保存試劑(如,當(dāng)指定保存溫度為2-8℃時(shí),應(yīng)避免將抗體置于室溫下)。保存抗體的經(jīng)驗(yàn)法則是將其置于非無霜冰箱/制冷機(jī)內(nèi)的嚴(yán)格密封容器中,遠(yuǎn)離組織固定劑和交聯(lián)試劑。除非加入穩(wěn)定蛋白,如BSA(1% w/v),否則抗體不得 在工作液中長期保存。避免長期保存稀釋的抗體。保存時(shí)遇到的主要問題是細(xì)菌或***污染。 如果抗體保存在2-8℃超過2-3天,建議進(jìn)行過濾除菌和/或加入抑菌劑/防腐劑,如0.05%疊氮化鈉或0.1%硫柳汞。上海益啟生物的科研抗體詢價(jià)公司電話。寶山區(qū)Calbiochem抗體抗體代理商
益啟生物是Merck抗體的代理商。青浦區(qū)H3抗體抗體咨詢問價(jià)
模塞只器生產(chǎn)廠家說明書,校準(zhǔn)Luminex儀器,至少每周一次或在溫度變化3℃時(shí)校準(zhǔn)。 一些Luminex儀器要求與試劑盒方案中所述不同的門)設(shè)置。使用儀器默認(rèn)設(shè)置。 檢查試劑盒說明書中正確的微珠區(qū)域或分析物選擇。 含有機(jī)溶劑的樣品,或如果樣品為高粘性,應(yīng)根據(jù)需要進(jìn)行稀釋或透析。PMimeLuminex只器4次,以除去氣泡;如果有任何殘留酒精或消毒液,用酒精或消毒液或水洗滌4次 在所有解育步理中,保持微孔板和微珠混合物用果蓋或鋁培覆蓋。加入適當(dāng)?shù)臋z測執(zhí)體并繼線t。青浦區(qū)H3抗體抗體咨詢問價(jià)