藥理學(xué)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)

斑馬魚消化道的解剖結(jié)構(gòu)和細(xì)胞結(jié)構(gòu)與人類消化道相似，具有同心圓層的內(nèi)上皮、結(jié)締組織、環(huán)狀肌肉和外縱肌層。三硝基苯磺酸（TNBS）的乙醇溶液造模法屬于正常免疫系統(tǒng)下的半抗原誘導(dǎo)性模型，當(dāng)TNBS的乙醇溶液灌腸時(shí)，乙醇作為有機(jī)溶劑溶解腸粘膜表面的黏液，暫時(shí)性破壞腸粘膜屏障，使TNBS和腸組織蛋白結(jié)合形成完全抗原，導(dǎo)致腸黏膜免疫系統(tǒng)針對(duì)該抗原的遲發(fā)性變化反應(yīng)，并造成腸黏膜的損傷。杯狀細(xì)胞是黏蛋白的主要來源，其數(shù)量和形態(tài)反應(yīng)腸粘膜的健康狀況，是腸粘膜異常的敏感指標(biāo)。由于斑馬魚通體透明的特點(diǎn)，有兩種方法檢測結(jié)腸炎的防治作用。1.觀察腸腔面積的變化，2.通過特異性染料（呈藍(lán)色）對(duì)腸道的杯狀細(xì)胞染色，通過觀察杯狀細(xì)胞數(shù)量來判斷腸粘膜的損傷情況。利用斑馬魚模型評(píng)價(jià)鎮(zhèn)痛作用。藥理學(xué)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)

利用斑馬魚模型評(píng)價(jià)防止肝臟出血作用他汀是人工合成的羥甲基戊二酸單酰輔酶A還原酶(3－h(huán)ydroxy-3－methylglutaryl－CoAreductase，HMGCＲ)抑制劑。在人類和嚙齒類動(dòng)物體內(nèi)，HMGCＲ功能被抑制可破壞正常血管的穩(wěn)定性和完整性，導(dǎo)致進(jìn)行性的血管膨脹、破裂。斑馬魚肝臟組織結(jié)構(gòu)和肝細(xì)胞成分與哺乳動(dòng)物相似。因?yàn)榘唏R魚幼魚通體透明性，肝臟出血后可以在顯微鏡下直接觀察到肝臟部位呈現(xiàn)紅色。.經(jīng)過每組30尾斑馬魚的對(duì)比實(shí)驗(yàn)，服用肝臟出血保護(hù)劑組的斑馬魚肝臟與未攝入辛伐他汀的正常對(duì)照組比較相似，并未出現(xiàn)模型對(duì)照組的肝臟出血的情況。2.本實(shí)驗(yàn)證實(shí)了羊藿苷具有明顯的***臟作用。藥品安全性有效性測試藥物功效評(píng)價(jià)-藥物毒性安全性評(píng)價(jià)項(xiàng)目 。

靜脈注射給予長春瑞濱造模斑馬魚抵抗力低下模型。大劑量長春瑞濱骨髓抑制明顯，導(dǎo)致血小板、紅細(xì)胞及白細(xì)胞數(shù)目（中性粒細(xì)胞、巨噬細(xì)胞、T細(xì)胞等）減少和貧血，導(dǎo)致抵抗力低下。人類與斑馬魚在免疫系統(tǒng)的細(xì)胞組成上極為相似，而且斑馬魚是目前所有同時(shí)具有特異性免疫和非特異性免疫動(dòng)物個(gè)體中體積較小的，適合高通量評(píng)價(jià)調(diào)節(jié)免疫功效。斑馬魚靜脈注射大劑量長春瑞濱后可造成免疫低下。采用轉(zhuǎn)基因T細(xì)胞紅色熒光斑馬魚，可在熒光顯微鏡在觀察到抵抗力低下的斑馬魚體內(nèi)的T細(xì)胞熒光強(qiáng)度明顯減弱

在對(duì)藥物臨床有效性研究資料的審評(píng)中應(yīng)關(guān)注的問題：1.研究設(shè)計(jì)的整體考慮（假設(shè)、缺乏對(duì)照數(shù)據(jù)、實(shí)驗(yàn)室檢測的不足）；2.關(guān)鍵數(shù)據(jù)的分析、所提供研究的選擇；3.終點(diǎn)的選擇（包括等級(jí)量表）、終點(diǎn)測量的合法性；4.對(duì)照藥的選擇；5.人群的選擇（兒童或不符合要求的患者）；6.入選的患者過少；7.療程不夠長；8.缺乏長期隨訪的數(shù)據(jù)；9.臨床研究數(shù)據(jù)的合法性（主要方案的違背或其他GCP問題）；10.與臨床療效相關(guān)的劑量方案確定；11.缺乏與臨床療效相關(guān)的特異的相互作用的研究（包括合并用藥和中和抗體）；12.觀察到的與適應(yīng)癥相關(guān)的臨床有效性大小的關(guān)系問題：邊緣/無臨床相關(guān)療效（包括療效的持續(xù)時(shí)間、）與臨床療效不一致、對(duì)臨床有效性的其他關(guān)注問題（藥效學(xué)腐代動(dòng)力學(xué)與現(xiàn)有比較的學(xué)定位）。斑馬魚模型評(píng)價(jià)基因毒性。

蛋黃粉中60%為脂類，用蛋黃粉喂食斑馬魚，可以使斑馬魚血液中的脂肪含量快速升高，從而建立斑馬魚血脂高癥模型。經(jīng)過油紅O特異性脂肪染色（與組織內(nèi)甘油三酯等脂肪滴結(jié)合呈橘紅色），血脂高斑馬魚血管內(nèi)肉眼可見明顯的脂質(zhì)聚積，通過靜脈注射，可見熒光標(biāo)記膽固醇的積累。我們?cè)u(píng)價(jià)斑馬魚降低血脂功效有4個(gè)指標(biāo)：1.斑馬魚血脂表型圖；2.斑馬魚總甘油三脂含量；3.斑馬魚膽固醇表型圖；4.斑馬魚總膽固醇含量。1.經(jīng)過每組30尾斑馬魚的對(duì)比實(shí)驗(yàn)，服用降脂產(chǎn)品組的血脂聚積情況與模型對(duì)照組比較明顯減少。2.本實(shí)驗(yàn)證實(shí)了阿托伐他汀鈣、辛伐他汀、洛伐他汀類降脂產(chǎn)品具有明顯的降脂降膽固醇作用。利用斑馬魚模型評(píng)價(jià)降尿酸功效。藥品安全性有效性測試

斑馬魚評(píng)價(jià)胃腸道粘膜損傷輔助保護(hù)功效。藥理學(xué)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)

我們將受測試斑馬魚分成三組，分別是正常對(duì)照組、模型對(duì)照組和藥物組。其中正常對(duì)照組未攝入維拉帕米，模型對(duì)照組與藥物組都攝入了等量的維拉帕米（維拉帕米通過溶解到養(yǎng)魚用水中的方式攝入到斑馬魚體內(nèi)）。藥物組先攝入地高辛之類的改善心動(dòng)過緩藥物再攝入維拉帕米。服用改善心動(dòng)過緩藥物后再加入維拉帕米共同處理至實(shí)驗(yàn)終點(diǎn)后，我們對(duì)斑馬魚統(tǒng)計(jì)斑馬魚的心率?？梢钥吹剑Ｐ蛯?duì)照組心率明顯減慢，服用藥物組的心率與正常對(duì)照組比較相似，沒有明顯的心率減慢。藥理學(xué)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)